有哪些方法可以用来测定蛋白质肽链的N末端和C末端？

发布者：黄更生     发布时间：2015-11-07    浏览数：0

N末端分析：

1) 二硝基氟苯法（利用2,4-二硝基氟苯在pH室温下与肽链N端第1个氨基酸结合成复合物，水解后其它残基被水解为游离氨基酸，只有N端第1个氨基酸与2,4-二硝基氟苯结合的复合物，即2,4-二硝基苯基氨基酸 DNP氨基酸）；

2) 丹酰氯法（DNS法，利用丹酰氯与N-端第一个氨基酸残基结合而得到分离目的）；

3)氰酸盐法（氰酸与与肽链N端第1个氨基酸结合，水解生成乙内酰脲氨基酸和少1个N的氨基酸，前者不带电而可与其他游离氨基酸分开）；

4) 氨肽酶法（氨肽酶就是从肽链氨基末端开始水解肽链成为氨基酸的酶。若控制得好，水解出一个氨基酸后，立即鉴定，就可得到N端第一个氨基酸）。

C-末端分析：

1）肼解法（肽链与无水肼反应，使C端氨基酸游离放出。C端为Cys时巯基易被破坏）；

2) 还原成氨基醇法（利用无机强还原剂硼氢化锂将C端游离羧基还原成醇，用6N HCL水解。层析分离氨基醇并鉴定。要严格防止在反应前肽链断裂）；